le boucle bactériologique C'est un instrument de travail utilisé par les microbiologistes pour le semis de cultures microbiennes (bactéries ou champignons). C'est peut-être l'instrument le plus utilisé par ces professionnels.
Son utilisation semble simple, mais en réalité elle nécessite beaucoup de formation. Avant de commencer le semis, la boucle doit être stérilisée au bec Bunsen, puis l'inoculum microbien pouvant provenir d'une culture liquide ou d'une culture solide est prélevé..
Une fois l'inoculum prélevé, il peut être déposé en milieu liquide ou ensemencé en milieu solide. Après chaque procédure, la boucle est à nouveau stérilisée. La poignée sert également à faire des frottis microbiens sur une lame.
La boucle bactériologique a de nombreux noms, notamment: boucle ou boucle de platine, boucle d'inoculation ou boucle d'ensemencement, mais son vrai nom est la boucle de Kohle..
Le matériau avec lequel le manche est réalisé est généralement un alliage nickel-chrome (nichrome) ou encore du platine. Les boucles bactériologiques jetables en plastique sont une autre variété disponible sur le marché..
D'autre part, il existe plusieurs types de boucles bactériologiques, chacune remplissant une fonction dans le cadre des tâches effectuées par un microbiologiste. Le choix de la poignée dépendra de ce qui doit être fait.
Par exemple, pour réaliser un striatum dû à une déplétion afin d'isoler un microorganisme, on utilise la boucle de platine qui se termine par un anneau fermé, qu'elle soit calibrée ou non..
Alors que, s'il s'agit de semer un échantillon d'urine, où il est important de quantifier les UFC, il est nécessaire d'utiliser la boucle calibrée. De même, pour inoculer les tests biochimiques, qui nécessitent d'être semés par ponction, la boucle d'aiguille est indispensable. Il est important que la poignée soit manipulée par du personnel formé.
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Les boucles bactériologiques sont constituées de deux extrêmes. Une extrémité correspond à la poignée ou à la base, tandis que l'autre est la poignée elle-même.
La base sert à saisir la poignée lors de la manipulation. Il est généralement métallique, mais possède un isolant thermique pour éviter que l'opérateur ne se brûle lorsque la pointe de la poignée est stérilisée sur le briquet. Il mesure environ 20 cm, bien qu'il puisse être plus long. Il a un fil pour ajuster la poignée.
C'est la fin fonctionnelle, c'est-à-dire la partie qui entre en contact avec les microorganismes et avec les milieux de culture. Il se compose d'un fil fin qui est inséré dans la base.
Le manche peut être en nichrome ou en platine, d'où le nom de manche en platine. Il mesure environ 6,5 cm de long et a un calibre d'environ 0,20 mm. La poignée avec la poignée peut mesurer 26,5 cm. Les mesures peuvent varier d'un fabricant à l'autre.
Il existe plusieurs types de boucles bactériologiques et chacune a une utilisation spécifique. Les types de poignées sont les suivants: poignée en forme d'anneau calibrée, poignée en forme d'anneau non calibrée, poignée droite ou aiguille, poignée spatulée, poignée en forme de «L» et poignée à pointe acérée.
Par contre, les poignées peuvent être permanentes ou jetables. Ceux destinés à un usage permanent sont stérilisés au briquet, réutilisables et très durables. Bien que les produits jetables soient stériles en usine, ils ne sont utilisés qu'une seule fois et sont jetés..
C'est la poignée la plus utilisée dans le laboratoire de microbiologie. Il est utilisé pour prélever un inoculum à partir d'une suspension microbienne (milieu liquide) ou d'une portion de colonie (milieu solide), à ensemencer dans un autre milieu de culture, soit un test biochimique, soit un milieu plus enrichi ou sélectif, selon le cas . Également utile pour réaliser des frottis microbiens sur une lame.
Avec ce type de boucle, l'inoculum initial peut être strié. Il est également conçu pour qu'il glisse en douceur sur la gélose, sans l'endommager. Bien sûr, cela nécessite un personnel formé pour gérer la technique de semis, en appliquant la force et les mouvements appropriés pour faire une bonne striation..
Avec cette poignée, diverses techniques d'ensemencement peuvent être effectuées. Exemple, les milieux solides dans les boîtes de Pétri sont généralement ensemencés par épuisement (il existe plusieurs techniques, voir vidéo 1).
Cette technique vise à obtenir des colonies isolées pour pouvoir les étudier et les identifier, notamment lorsque l'échantillon est polymicrobien, c'est-à-dire que la culture n'est pas pure (elle contient plus d'un type de microorganisme)..
Au lieu de cela, les cales sont plantées en un simple zigzag pour obtenir une masse bactérienne, n'étant pas nécessaire dans ce cas pour isoler les colonies.
Parfois, ils sont également utilisés pour prélever certains échantillons. Par exemple, Rojas et al.Utilisé la boucle bactériologique pour recueillir des échantillons de tissus vaginaux raclés sur des rats..
Cette poignée, comme son nom l'indique, est calibrée pour recevoir une quantité spécifique de suspension microbienne. Il est utilisé lorsqu'il est nécessaire que l'inoculum soit conforme à ce qui est normalisé dans la technique.
Par exemple, il est très courant de planter des cultures d'urine. Dans ce cas, une boucle calibrée de 0,01 ml et une de 0,001 ml peuvent être utilisées..
Il est à noter que les poignées calibrées présentent une marge d'erreur, qui varie en fonction de l'angle avec lequel l'échantillon est prélevé et de la taille de l'embouchure du récipient..
Si la poignée de 0,001 ml est insérée verticalement dans un récipient avec une petite bouche (≤ 7 mm), la quantité prélevée sera de 50% inférieure à celle souhaitée.
Cela se produit parce que plus le diamètre de l'embouchure du récipient est petit, plus la tension superficielle et donc les forces d'adhérence entre (verre - liquide) augmentent. Cela réduit la charge de liquide prise par la poignée.
Alors que, si elle est prise à un angle de 45 ° dans un récipient à large ouverture (≥ 22 mm), 150% de plus que la quantité requise peut être collectée. Dans ce cas, la tension superficielle est plus faible et les forces de cohésion verre / plastique diminuent, tandis que la force de cohésion liquide-liquide augmente..
En raison de ce qui précède, d'autres méthodes de quantification des unités formant des colonies sont parfois préférées pour les cultures d'urine..
Il est également appelé poignée de filetage. Il est utilisé pour inoculer certains tests biochimiques, en particulier ceux qui nécessitent d'être ensemencés par la technique de ponction. Exemple, supports semi-solides préparés sous forme de bloc, tels que: support SIM, MIO et O / F.
De plus, dans le cas des MIO et SIM qui évaluent la motilité, il est essentiel que la ponction soit réalisée avec une boucle d'aiguille, car l'interprétation d'une motilité positive se produit lorsque les bactéries se développent vers les côtés de l'inoculum initial..
Un test inoculé avec une boucle en boucle peut fausser les résultats (faux positif). Pour cette raison, dans ce type de semis, il faut veiller à ce que la crevaison soit unique, et qu'en la retirant, elle ressorte dans le même sens où elle est entrée.
Un autre test qui devrait être ensemencé à l'aiguille même s'il est préparé en forme de coin est le Kligler. Dans ce test, il n'est pas recommandé que l'oxygène pénètre profondément dans la gélose, car un milieu pauvre en oxygène est nécessaire pour que certaines réactions chimiques se produisent. Cette poignée est également utilisée pour toucher une colonie spécifique afin de repiquer.
La plupart des micro-organismes donnent des colonies molles et faciles à éliminer. Cependant, il existe certains agents microbiens dont les colonies sont dures et sèches, par exemple les mycobactéries en général et certains champignons. Dans ces cas, il est utile d'utiliser la poignée spatulée.
Son utilisation la plus fréquente est de carilloner les cultures fongiques, en particulier les moisissures..
Il est utile pour prélever de très petites colonies présentes dans des cultures polymicrobiennes, afin de pouvoir les repiquer.
La poignée doit être stérilisée avant et après utilisation. Pour stériliser la boucle bactériologique dans le briquet, procédez comme suit: la poignée doit être placée au sommet de la flamme, en adoptant une position la plus verticale possible, de manière à stériliser de la pointe vers le haut..
Lorsque le filament fin devient rouge vif, on peut dire qu'il est stérile. Pour l'utiliser, il est refroidi et l'échantillon choisi est prélevé. (Voir vidéo 2).
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