La orcéine est une couleur violette naturelle, extraite de divers lichens tels que: orchilla ou ourschilla, lichen fruticoso, Rocella tinctoria Oui Lecanora parella surtout. La Rocella tinctoria On le trouve sur le continent africain et américain, bien qu'il puisse être remplacé par d'autres espèces situées en Europe.
Cette coloration a été largement utilisée dans les études cytogénétiques depuis l'Antiquité. En ce sens, la préparation d'orcéine qui contient de l'acide acétique a été introduite par LaCourt en 1941, c'est pourquoi elle a été initialement appelée technique LaCourt..
De même, en raison de sa simplicité et de son faible coût, il a été utilisé pour la fabrication de tournesol (colorant extrait des lichens) et dans des études histologiques (coloration des cellules et des tissus)..
Plusieurs études ont utilisé ce colorant combiné à d'autres produits chimiques, tels que le picrocarminate d'ammoniaque et l'acide acétique, pour colorer respectivement les fibres élastiques et les chromosomes. À l'heure actuelle, l'orcéine continue d'être utilisée dans les études cytogénétiques sur les animaux et les plantes..
Récemment, Silva et al. 2017 a utilisé avec succès cette tache pour observer les différents changements qui se produisent dans les fibres élastiques de la peau du pouce chez les personnes âgées chiliennes. Cette étude a révélé comment les fibres du pouce se modifient avec le vieillissement.
En ce sens, on a observé que les fibres élastiques étaient de couleur noir brunâtre chez les individus de plus de 80 ans; tandis que chez les plus jeunes (à partir de 60 ans), ils sont vus comme une couleur brun rougeâtre. Le cytoplasme et les autres structures cellulaires virent au vert jaunâtre.
Ceci a permis de corroborer la présence et l'état des fibres élastiques, en termes de disposition, quantité et intégrité. D'autre part, il a également été souligné que l'orcéine est d'une grande aide pour identifier les anévrismes et diagnostiquer l'artérite, entre autres conditions..
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L'orcéine fait partie du groupe des colorants oxazine et la coloration est basée sur son affinité pour l'ADN. Le colorant se lie à la charge négative de cette molécule, représentée par le groupe phosphate. C'est pourquoi les chromosomes sont colorés en violet.
Cependant, le reste des structures de la cellule prend une couleur différente. Plus précisément, dans le cas des fibres élastiques, elles sont colorées en brun rougeâtre, les noyaux cellulaires du bleu au violet foncé, tandis que le collagène ne tache pas.
Pour cette raison, l'orcéine est utilisée pour colorer la chromatine et différencier le sexe chez certaines espèces de mouches. De même, les noyaux et certaines inclusions hépatiques produits par les antigènes de l'hépatite B peuvent être colorés..
Les solutions d'Orcéine ont des fonctions spécifiques dans la coloration. L'orcéine A a pour fonction de ramollir les membranes cellulaires, provoquant leur mort et paralysant le processus de leur division. Parallèlement, l'orcéine B se charge de compléter la coloration par son adhésion aux chromosomes..
Pour préparer une solution à 1% d'acéto-orcéine, 2 grammes d'orcéine sont dissous dans 45 ml d'acide acétique glacial, de préférence chaud, et 55 ml d'eau distillée sont ajoutés à température ambiante..
Ensuite, il est constamment mélangé pour homogénéiser la solution, pour la laisser ensuite reposer jusqu'à ce qu'elle refroidisse. Enfin, il est conservé à 4 ° C dans des bouteilles sombres. Cette préparation a été utilisée par Flores 2012 pour observer les phases de maturation des ovocytes de vache..
Dans ce cas, par exemple, la solution d'acéto-orcéine est placée sur le tissu préalablement fixé dans l'acide acétique-éthanol pendant 24 heures. Ce processus de coloration est effectué pendant 30 minutes et le tissu est ensuite décoloré..
De même, il peut être utilisé dans l'identification des organites dans les tissus multicellulaires. Dans ce cas, un frottis de la muqueuse buccale est coloré avec une goutte de la solution d'acéto-orcéine, la lamelle est placée sur la lame et immédiatement le noyau de la cellule avec ses sous-structures peut être observé.
De plus, l'orcéine peut être préparée avec d'autres produits chimiques tels que l'acide lactique et l'acide propionique. Pour ce faire, un gramme d'orcéine est dissous dans une solution prémélangée à température ambiante de 23 ml d'acide lactique et 23 ml d'acide propionique; compléter le volume avec de l'eau distillée jusqu'à 100 ml.
Avec cette solution d'orcéine lacto-propionique, il est possible d'observer les différentes phases de la division méiotique des cellules végétales. Dans ce cas, l'échantillon pré-fixé et hydrolysé est placé pendant 15 minutes dans la solution d'orcéine lacto-propionique puis le tissu est étalé sur des lames de microscope..
Dans l'étude de Duque en 2016 sur les chromosomes polyéthylènes, il a utilisé une préparation de 2 grammes d'orcéine diluée dans de l'acide acétique et 85% d'acide lactique, diluée avec une solution d'acide acétique à 65%. Enfin, il a examiné les chromosomes dans les glandes salivaires de la Drosophila melanogaster.
Il est important de noter qu'en fonction de l'échantillon et de ce qui doit être évalué, la solution d'orcéine appropriée est préparée. Ainsi, par exemple, de l'acide chlorhydrique 1 N est ajouté à la solution d'orcéine A pour observer les cellules en division..
Alors que la solution d'orcéine B est dissoute dans de l'acide acétique à 45%. Cette technique est une méthode abrégée de coloration et est généralement utilisée comme complément à la coloration des structures chromosomiques..
Depuis des siècles, dans les pays du continent américain comme l'Argentine, vous pouvez obtenir des lichens tels que: Lecanora, Parmelia Oui Ombilicaria, qui sont d'excellentes sources d'orcéine. Aussi les zones européennes telles que les îles Canaries, étaient à l'époque de grands producteurs de l'orchilla.
Celui-ci était exporté vers d'autres villes de ce même continent comme Gênes et des pays comme l'Angleterre, tandis que la Hollande monopolisait la fabrication du tournesol à partir de l'orchilla. Donc plus tard, ce lichen a été réduit jusqu'à ce qu'il soit sur le point de s'éteindre.
Cela a conduit à remplacer l'orchilla par d'autres plantes aux propriétés colorantes. Cependant, l'émergence de colorants synthétiques a contribué à la fin du commerce de cette source de lichen d'orcéine..
Cela a été possible grâce à Cocq, qui en 1812 a décrit la synthèse de l'orcéine, sachant alors qu'elle est synthétisée par un composé phénolique appelé orcinol. Cependant, malgré cela, l'orcéine naturelle est toujours la préférée.
Cela peut être dû au fait que l'orcinol est un composé à très forte odeur dont une exposition prolongée pourrait entraîner des risques pour la santé, tels que la perte de capacité à détecter les odeurs. Ces dommages à l'hypophyse pourraient passer de temporaires à permanents au fur et à mesure de l'exposition..
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