La thymolphtaléine est un indicateur de pH dont le nom scientifique est: 3,3-bis [4-hydroxy-2-méthyl-5- (1-méthyl) phényl] -1 (3H) -isobenzofuranone et sa formule chimique est C28H30OU ALORS4. Il est synthétisé à partir d'anhydride phtalique et de thymol.
Cet indicateur de pH a des propriétés très particulières, car à pH extrêmement bas, il est rouge intense (pH < 0). Posteriormente hay un amplio rango de pH en donde es completamente incoloro (pH 1 - 9,2), con un rango de viraje entre 9,3 a 10,5 donde puede cambiar a azul, mientras que por encima de 10,5 es azul intenso.
Ses applications incluent le fait de servir d'indicateur acido-basique dans certaines réactions chimiques. Il est également utilisé comme chromogène dans certaines réactions colorimétriques où l'activité enzymatique est évaluée. Par exemple, dans la détermination de la phosphatase alcaline.
En ce qui concerne la toxicité, il est moins nocif que les autres indicateurs de pH, étant classé par la National Fire Protection Association (NFPA) au niveau 1 par rapport à ses effets sur la santé; ce qui signifie qu'il n'est ni cancérigène ni mutagène.
Il n'a pas non plus de toxicité spécifique contre un organe cible; c'est-à-dire qu'il représente un faible risque d'agression pour la santé. Cependant, le contact direct avec la peau et les muqueuses peut provoquer une légère irritation..
En revanche, en termes d'inflammabilité, il est classé 1 et en termes de réactivité nul..
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L'indicateur de pH thymolphtaléine sous sa forme solide est une poudre blanche, à l'état liquide, il est rouge intense à pH inférieur à zéro, incolore à pH 1-9,2 et bleu au-dessus de 10,5. Sa masse molaire est de 430,54 g / mol, avec un point de fusion de (258 ° C), tandis que le point d'ébullition est compris entre 248-252 ° C. La densité est de 0,92 g / mL à 25 ° C
Il est insoluble dans l'eau froide et soluble dans l'éthanol. Ce n'est pas une substance explosive.
Par mesure de précaution, pendant le transport, le stockage et la manipulation doivent être tenus à l'écart des oxydants forts.
L'indicateur de pH thymolphtaléine à une concentration de 0,1% est généralement utilisé pour l'analyse volumétrique. Pour ce faire, procédez comme suit:
- Peser 100 mg de thymolphtaléine et dissoudre dans 100 ml d'alcool éthylique à 95%.
Il peut également être préparé comme suit:
- Peser 100 mg de thymolphtaléine et dissoudre dans 60 ml d'alcool absolu, et ajouter 40 ml d'eau distillée.
- Conserver à température ambiante (15-25 ° C). Il est important que le lieu de stockage soit frais, ventilé et exempt d'humidité.
Pour déterminer ce test, il existe une technique basée sur l'action hydrolytique de la phosphatase alcaline sur le monophosphate de thymolphtaléine. Si de la phosphatase alcaline est présente, elle hydrolysera le monophosphate de thymolphtaléine, libérant de la timolthaléine.
Cela produit une teinte bleue à pH alcalin. L'activité enzymatique de la phosphatase alcaline est directement proportionnelle à l'intensité de la couleur formée. L'absorbance est lue à 590 nm.
En ce sens, Shao F et ses collaborateurs ont développé en 2018 une technique colorimétrique dans laquelle ils utilisent des nanoparticules de silice mésoporeuses qui piègent les molécules de thymolphtaléine, fortement liées par la présence de phényltriméthyloxysilane..
A leur tour, ces nanoparticules ont été enrobées de polyéthylèneimine (PEI), favorisant la liaison de l'anticorps secondaire anti-PSA..
D'autre part, l'échantillon de patient a été immobilisé sur une plaque; et lorsque le PSA présent est en contact avec les nanoparticules, il se lie aux anticorps. Les nanoparticules qui ne se lient pas seront supprimées.
Par la suite, la thymolphtaléine sera facilement libérée en ajoutant une solution alcaline, ce qui génère une coloration bleue. Le degré de couleur est directement proportionnel à la concentration de PSA.
En utilisant l'indicateur de pH thymolphtaléine, l'activité enzymatique de l'arginine kinase peut être déterminée. Le test est basé sur les éléments suivants:
L'enzyme arginine kinase est une phosphotransférase qui participe à la formation de la phosphoarginine, comme le révèle la réaction chimique suivante:
Si cette réaction est effectuée contre l'indicateur de pH thymolphtaléine, il est possible de mesurer l'activité enzymatique. Ceci est possible selon l'explication suivante: la réaction se produit à un pH alcalin, où la thymolphtaléine montrera sa couleur bleue..
L'activité enzymatique est mesurée par la décoloration de la couleur reflétée par la diminution de l'absorbance à 575 nm, car à mesure que l'enzyme agit, des protons (H +) sont libérés, ce qui acidifie le milieu..
Cela provoque la perte de couleur de la thymolphtaléine une fois qu'elle s'approche de la zone de virage. Si le pH tombe en dessous de 9,2, il devient complètement incolore.
Par conséquent, l'intensité de la couleur bleue est inversement proportionnelle à l'activité enzymatique.
Ce composé est moins toxique que la plupart des indicateurs de pH, car aucun effet cancérigène ou mutagène ne lui a été attribué jusqu'à présent. Cependant, il n'est pas totalement inoffensif: au contact de la peau et des muqueuses, il peut provoquer des rougeurs dans les zones mentionnées..
Il peut également produire des réactions indésirables en cas d'ingestion ou d'inhalation accidentelle..
En cas de contact direct avec la peau et les muqueuses, la zone affectée doit être lavée à grande eau pendant au moins 15 minutes. Et s'ils constatent des signes d'irritation, ils doivent se rendre au centre de santé le plus proche.
C'est pourquoi l'utilisation d'outils de sécurité tels que blouse, gants et lunettes de sécurité est recommandée lors de la manipulation.
Malgré un faible risque d'inflammabilité, il est recommandé, par prudence, de rester à l'écart des briquets.
Bien qu'il soit moins toxique pour la santé humaine, il est toxique dans les milieux aquatiques, affectant les organismes qui s'y trouvent. De plus, il a un pouvoir de bioaccumulation élevé et, à long terme, il est possible que des produits de dégradation nocifs pour l'environnement puissent se former..
Par conséquent, il faut éviter que ce produit n'atteigne les eaux de surface ou souterraines, car il affecterait l'eau potable..
En ce sens, les laboratoires qui utilisent cet indicateur doivent éliminer leurs déchets conformément à la réglementation en vigueur dans chaque pays..
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